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產(chǎn)品中心
鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針

鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針

簡要描述:

鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細(xì)胞膜滲透性zui受huan迎的活細(xì)胞熒光染料,用來標(biāo)記和監(jiān)測活細(xì)胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。

產(chǎn)品時間:2024-07-16

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Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯


產(chǎn)品關(guān)鍵詞:

Calcein, AM 鈣黃綠素AM;Calcein Deep Red 鈣黃綠素深紅色;Cy5; 活細(xì)胞染色;Fluorescein diacetate (FDA);Propidium Iodide(PI)碘化丙啶;

 

產(chǎn)品信息                                                                                    

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號         

規(guī)格            

價格(元)    

Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯    

MX3016-1MG

1mg

3380

【溫馨提示】:見我司(懋康生物)整理的鈣黃綠素(Calcein)系列產(chǎn)品專題,尋找最合適波長的鈣黃綠素活細(xì)胞探針。


產(chǎn)品描述

Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細(xì)胞膜滲透性zui受huan迎的活細(xì)胞熒光染料,用來標(biāo)記和監(jiān)測活細(xì)胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。然而,Calcein, AM單一顏色使其不能將其用在多重標(biāo)記實驗,比如,其無法和GFP轉(zhuǎn)染細(xì)胞聯(lián)合使用,因光譜一致。為了解決這一應(yīng)用缺陷,我司特別開發(fā)出Calcein Red(貨號:MX3013),Calcein Deep Red(貨號:MX3016)這些衍生物,能夠聯(lián)合GFP或FITC等熒光素實現(xiàn)對活細(xì)胞的多重標(biāo)記和功能分析。


我司(懋康生物)提供的鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯(Calcein Deep Red AM)自身無熒光,具有細(xì)胞膜滲透性。能夠輕易進(jìn)入活細(xì)胞,被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成鈣黃綠素深紅(Calcein Deep Red),產(chǎn)生強(qiáng)烈的深紅色熒光(Ex/Em=643/663nm),用標(biāo)準(zhǔn)的Cy5濾片設(shè)置檢測。


產(chǎn)品特性

1)  同義名:Calcein Deep Red AM;Calcein Deep Red AM Ester;鈣黃綠素乙酰氧基甲酯(深紅色),鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯;

2)  分子量:~600

3)  純度:≥95%(HPLC)

4)  Ex/Em:643/663nm

5)  溶解性:溶于DMSO(1~5mM)


應(yīng)用實例

鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針

Fig 1.HeLa細(xì)胞(活細(xì)胞+固定細(xì)胞)經(jīng)Calcein Deep Red AM(# MX3016)染色的圖片。


保存與運輸方法

保存:-20℃干燥保存,避免強(qiáng)光直射,有效期一年。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

  1. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

  2. 本品從冰箱取出后請在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量,開封前請將其短暫離心,以保證粉末落入管底。

  3. 本品對濕度非常敏感,粉末保存一定要保持干燥。儲存液需要分裝避光凍存,且必須緊緊密封蓋子,干燥保存。工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。

  4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用方法

1、儲存液制備

儲存液配制范圍可為2~5 mM,具體根據(jù)工作濃度來決定,建議提前配制成1000×儲存液。若使用的工作液為5μM,那么可配制5mM的儲存液,即往1mgCalcein Deep RedAM(Mw ~600)內(nèi)加入333μl細(xì)胞培養(yǎng)級別的DMSO(貨號:MS4601A-100ML)即可。儲存液需要根據(jù)單次用量分裝,-20℃避光干燥保存,一定要避免受潮,此種情況下可穩(wěn)定保存數(shù)月。


2、染色工作液制備

于正式實驗前,或溶解Calcein Deep RedAM粉末配制儲存液,或取一管已配制好的Calcein Deep RedAM儲存液并回至室溫使充分融化。用添加有2.5mM丙huang舒的HHBS(Hanks with 20mM Hepes buffer)或其他適當(dāng)?shù)木彌_液(pH 7.0)稀釋儲存液到5~10 µM工作濃度。

【注1:Calcein Deep Red染色工作液很不穩(wěn)定,需要使用前配制。】

【注2:許多細(xì)胞都含有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運體。因此高度推薦染色工作液內(nèi)添加2.5mM丙huang舒(有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運體抑制劑),以防止熒光探針泄露到細(xì)胞外。】


3、染色步驟

以下是基于96孔板的Calcein Deep Red活細(xì)胞染色步驟,僅作參考。具體實驗請根據(jù)自身要求做調(diào)整。

  1. 細(xì)胞準(zhǔn)備:于黑框/透明底的96孔微孔板內(nèi)按照100~10,000個細(xì)胞/孔的量鋪板。設(shè)置空白孔(不含細(xì)胞的培養(yǎng)基)。【注意】:每種細(xì)胞系需要根據(jù)實際情況來確認(rèn)細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性誘導(dǎo)的細(xì)胞密度。增殖分析,細(xì)胞密度相對少些;毒性分析,起始細(xì)胞密度高些。建議96孔板的單孔體積為100 µL。

  2. 藥物處理:加待測藥物到細(xì)胞內(nèi)處理適當(dāng)時間(比如24h,48h或96h)。設(shè)置空白孔(不含細(xì)胞的培養(yǎng)基),加入相應(yīng)量的待測藥物。【注意】:藥物添加前可不用清洗細(xì)胞。然而,若是藥物是血清敏感性,那在添加藥物前需要吸掉生長培養(yǎng)基和血清因子。替換之細(xì)胞用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。

  3. 吸掉培養(yǎng)基。【注意:探針加載前必須去除培養(yǎng)基】

  4. 按照100 µL/孔(96孔板)的量加入Calcein Deep Red染色工作液。

  5. 室溫或37℃避光孵育1h。【注意1:適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于細(xì)胞類型和使用的細(xì)胞濃度。每個實驗建議進(jìn)行孵育時間優(yōu)化。】【注意2:對于懸浮細(xì)胞,探針孵育結(jié)束后,于800rpm離心2min。】

  6. 用含合適濾光片(Ex/Em= 643nm/663nm)的儀器進(jìn)行熒光檢測。【注意:如果熒光背景高,可在熒光信號檢測前用含2.5mM丙huang舒的HHBS緩沖液替換Calcein Deep Red染色工作液。】


相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格                   

MX3011-50UG         

Calcein, AM, Ultra Pure Grade鈣黃綠素(綠色)

50μg

MX3012-500T

Calcein AM/PI Double Stain Kit活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒    

500T

MX3013-1MG

Calcein Red, AM鈣黃綠素紅(紅色)

1mg

MX3015-1MG

Calcein Blue, AM鈣黃綠素藍(lán)(藍(lán)色)

1mg

MX3016-1MG

Calcein Deep Red AM鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯

1mg

MZ8471-1G

Probenecid丙huang舒

1g

MZ8472-154MG

Probenecid Sodium, Water Soluble丙huang舒鈉(水溶性)

2×77mg

MX4205-10MG

Propidium Iodide碘化丙啶

10mg

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針

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